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            5種趨化性實驗的不同方法

            發布時間: 2024-03-26  點擊次數: 170次

            趨化性是細胞響應化學信號而進行的精心安排的運動,是生物學中的一種基本現象,具有深遠的影響。不同領域的研究人員利用這一過程來探索細胞行為、免疫反應和發育機制。在癌癥研究中,趨化性揭示了細胞如何駕馭其環境,從而促進腫瘤的進展和轉移。在免疫學中,趨化性引導免疫細胞到達感染部位。除了基礎研究之外,了解這種現象還可以應用于醫學和生物技術。


            在本文中我們將探討研究文章,重點介紹研究趨化性的不同方法。這些研究側重于實時可視化,提供對細胞反應的動態洞察。實時測量捕獲關鍵事件和動力學,與終點方法相比,可以全面了解趨化運動。這使得研究人員能夠揭示復雜的細節,從而影響我們對這一基本生物現象的理解。


            1. 納米粒子作為“分子敲除"來破壞趨化性

            在這項跨學科研究中,Zhang 等人。探索了納米顆粒(NP)通過充當“分子敲除"來破壞趨化性的潛力。該研究旨在檢驗納米顆??梢杂行节吇肿拥募僭O,從而降低其生物利用度,從而抑制趨化性。該實驗利用了良好的-建立了涉及人單核細胞系THP-1及其趨化劑單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)的模型系統。

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            該研究采用了與 MCP-1 具有不同預測相互作用的金納米顆粒 (AuNPs) 庫,模擬了趨化性測定中細胞外基質的體內3D 環境。研究結果強調了化學引誘劑吸附對納米顆粒的深遠影響,改變它們在細胞附近的濃度并驅動細胞行為的變化,而所有這些都不需要納米顆粒物理進入細胞。這種創新方法讓人們了解納米粒子如何充當分子調節劑,為研究和操縱趨化反應的新策略開辟了途徑。


            2. NET-DNA作為癌癥轉移中的動態趨化因子

            Yang等人的這項研究。探索中性粒細胞胞外陷阱 (NETs) 及其在癌癥轉移中的作用。NET 是由 DNA、蛋白質和組蛋白組成的網狀結構,由中性粒細胞釋放以捕獲和中和病原體。該研究揭示了乳腺癌和結腸癌患者肝轉移瘤中豐富的 NETs,挑戰了 NETs僅作為微生物陷阱的傳統觀念。相反,NET-DNA 作為 NETs的一個組成部分,作為一種動態趨化因子出現,積極吸引癌細胞,促進遠處轉移的形成。

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            通過使用 Transwell 和μ-Slide Chemotaxis測定進行細致評估,該研究證明了 NET-DNA 促進 MDA-MB-231 三陰性乳腺癌細胞遷移和粘附的令人信服的能力。細胞遷移的劑量依賴性增強進一步強調了這種效應,這種現象在用 DNase I 處理后被消除。μ-Slide Chemotaxis測定證實了這些發現,揭示了 MDA-MB-231 細胞向更高 NET 的有效遷移DNA 梯度。這些發現為理解免疫反應、NET 和癌癥進展之間復雜的相互作用開辟了新途徑,為轉移性疾病的治療干預提供了潛在的目標。


            3. Prokineticin-2 在 CNS 損傷中星形膠質細胞趨化作用中的作用

            在這項神經生物學研究中,Neal等人。揭示了 Prokineticin-2 (PK2)(一種趨化因子樣信號蛋白)的新維度。他們的發現揭示了其在促進星形膠質細胞趨化性方面的關鍵作用——這是中樞神經系統(CNS)損傷情況下的重要機制。當中樞神經系統受傷或患病時,星形膠質細胞會被激活并遷移到受損部位,從而促進再生反應?;?PK2 已知參與巨噬細胞和單核細胞等系統細胞類型的激活和遷移,該研究探討了 PK2 是否充當星形膠質細胞的趨化因子。

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            利用 ibidi µ-Slide Chemotaxis 和 U373 人星形細胞瘤細胞系,研究人員證明 PK2 確實可以作為趨化因子,顯著增強星形膠質細胞的遷移。在重組 PK2 (rPK2) 存在的情況下,觀察到向前遷移指數 (yFMI) 顯著增加,這強調了對含有 PK2 的儲層的明確方向響應。這種遷移的定向增強伴隨著遷移速度和方向性評分的顯著增加,強調了 PK2 作為星形膠質細胞趨化性刺激劑的重要作用。


            4. 血小板裂解物負載 PEG 水凝膠誘導干細胞趨化性

            在這項轉化研究中,Chahal 等人。研究載人血小板裂解物 (PL) 的聚乙二醇 (PEG) 水凝膠在體外誘導干細胞趨化性的潛力。血小板裂解物含有多種已知可介導細胞活性的蛋白質和生長因子,其中一些被鑒定為能夠誘導細胞遷移的化學引誘劑。該研究探索使用摻有 90 vol% PL 的 PEG 水凝膠來檢查其對人類間充質干細胞 (hMSC) 的遷移影響。

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            使用μ-Slide Chemotaxis進行細胞遷移研究。跟蹤細胞軌跡和遷移參數表明,hMSC 表現出向負載 PL 的水凝膠的定向遷移,與對照組相比,顯示出更高的速度和直接性。這項研究強調了負載 PL 的 PEG 水凝膠的生物活性潛力,展示了它們吸引干細胞的能力——這是內源性組織工程應用令人興奮的前景。


            5. RAB35在定向運動和趨化性中的作用

            在這項關鍵研究中,Corallino 等人。揭示 RAB35 在控制最佳方向運動和趨化性方面的作用。該研究利用基于 RNAi 的方法,將 RAB35 確定為協調這些基本細胞過程的關鍵要求。

            為了證實這一觀點,該研究深入研究了對照和 RAB35 沉默的小鼠胚胎成纖維細胞 (MEF) 在血小板衍生生長因子 (PDGF) 梯度中通過精心設計的柱陣列的遷移行為。該微柱陣列由光固化雜化聚合物組成,間隔 4 μm 的空間,固定在粘性滑動趨化室自粘底面的中心區域。從細胞庫區域的入口策略性地接種細胞,并在細胞出口區域以 20 ng/ml 的濃度引入趨化劑 (PDGF)。使用倒置顯微鏡記錄動態細胞運動。

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            對照細胞表現出功能性 RAB35 通路,表現出對 PDGF 梯度的定向趨化性。這些細胞延伸出持久的遷移突起,主要與梯度方向一致排列。形成鮮明對比的是,RAB35 的缺失顯著損害了趨化性,同時減少了沿梯度方向突出的細胞數量。通過延時監測細胞運動,并通過趨化和遷移工具分析手動跟蹤的細胞。這種綜合實驗方法強化了 RAB35 在響應趨化信號而控制細胞定向運動方面的關鍵作用,為了解這些基本細胞過程背后的分子復雜性提供了寶貴的見解。


            結論

            這些研究文章對細胞響應化學信號的行為進行了引人入勝的探索,涵蓋納米技術、癌癥研究、轉化研究、神經生物學和基于 RNAi 的方法等不同領域??偟膩碚f,這些研究不僅為趨化性研究的不斷發展做出了貢獻,而且還激發了新的視角和方法,為醫學創新策略鋪平了道路。


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